BOVOGEN品牌，胎牛血清SFBS，新生牛SNCS

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公司主營業務：胎牛血清（HAKATA、HyClone、SERANA、NTC、Corning、BOVOGEN、PAA、PAN、SIGMA、GEMINI），無外泌體血清(SBI)，ELISA試劑盒，細胞（800多株通過STR鑒定），代購ATCC原代細胞，HAKATA、HyClone培養基（干粉、液體）、雙抗、胰酶，CST，Abcam，Sigma等抗體。

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1、如何儲存和解凍血清才不會使產品質量受損   

將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規則地搖晃均勻。

長時間儲存在2～8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白（如冷凝集素、纖維蛋白原、纖粘蛋白等）可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此，推薦在-20℃以下儲存血清，并避免反復凍融。 建議血清應保存在-20℃。若存放于4℃時，請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內，再放回冷凍。

2、血清中包含絮狀沉淀，他們是什么，怎么處理？

沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性，不會影響產品性質。要除去沉淀，離心血清（400g，1～2分鐘）或者簡單的讓其沉淀在瓶子底部，將血清小心的轉移到另一個無菌瓶里（一般不建議采用過濾的方法除去沉淀，因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾）。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解。所以，使用產品時要搖動并加熱血清至37℃，沉淀會自然消失.

3、如何避免血清中產生沉淀？

（1）解凍血清時，隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發生。   

（2）血清分裝凍存時，須規則搖晃均勻（小心勿造成氣泡），使溫度與成分均一。   

（3）勿由-20℃直接放置于37℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發生沉淀。   

（4） 勿將血清置于37℃太久，否則血清會變得渾濁，同時血清中許多較不穩定的成份也會因此受到破壞，從而影響血清的品質。   

（5） 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。   

（6） 若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。

4、培養基中添加了血清和抗生素后，可以長期保存嗎？

一旦在新鮮培養基中添加了血清和抗生素時，盡量在1個月內使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分可能在解凍后就開始降解。  

5、細胞培養中出現黑點是污染嗎？如何處理？   

在細胞培養的過程中發現有黑點生成，首先，要肉眼觀察培養基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養細胞生長的狀態，黑點是否游動。如果細胞被污染，微生物則會大量繁殖，培養基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。

（1）細胞生長過老，破碎的細胞殘骸；

（2）血清質量不好，反復凍融的結果；

（3）配制培養基的pH值偏高，不宜細胞生長；

（4）配制培養基的水質、容器不合格。可應用離心、過濾的方法去除這些黑點；

（5）培養原代細胞中出現小黑點，可能是原代組織中的雜質，多次傳代可以消除。  

 6、細胞培養中如何防止黑點生成？

（1） 盡可能地減少血清凍融次數；

（2） 培養基無需37℃水浴；

（3） 培養基保持*PH值7.0~7.2；

（4） 嚴格控制配制培養基的水質，容器定期刷洗；

（5） 掌握細胞傳代的*時機，細胞切勿生長過老。

7、 為什么要熱滅活血清?

加熱可以滅活補體系統。激活的補體參與溶解細胞事件，刺激平滑肌收縮，細胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學 研究，培養ES細胞、平滑肌細胞時，推薦使用熱滅活血清。

8、有必要做熱滅活嗎?

實驗顯示，經過正確處理的熱滅活血清，對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進，或*沒有任何作用，甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量，而造成細胞生長速率的降低。而經過熱處理的血清，沉淀物的形成會顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點”，常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環境中，又會使此沉淀物更增多，使研究者誤認為是微生物 的分裂擴增。若非必須，可以不需要做熱處理這一步。不但節省時間，更確保血清的質量!

1. 小牛血清和胎牛血清有何區別與注意事項?

來源不同：胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清，新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛。
    組份與比例不同：兩者所含的促細胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質等組份與比例不同，用途與用法不同：某些細胞必需胎牛血清才能生長，而有些細胞只需小牛血清即可，使用濃度不同，一般在5%-10%，有特殊要求的濃度在20%。

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