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技術(shù)文章 / article
細胞培養(yǎng)中為什么要加入胎牛血清?
2021-11-23 瀏覽次數(shù):1606
一、胎牛血清的功能
血清的成分十分復(fù)雜,既有協(xié)助物質(zhì)運輸?shù)牡鞍住I養(yǎng)物質(zhì),還有促進細胞生長的激素和因子等,正因為血清這種天然成分的復(fù)雜性,使得血清在細胞培養(yǎng)過程中發(fā)揮了多種功能:
1.提供維持細胞生長的激素,促進所培養(yǎng)細胞的生長;
2.彌補基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或含量很少的營養(yǎng)物質(zhì);
3.提供結(jié)合蛋白,促進細胞識別和利用維生素、脂類和其他激素等;
4.某些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用;
5.促進細胞貼壁,提供可促進細胞鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)的因子;
6.起酸堿度緩沖液作用;
7.提供蛋白酶抑制劑,使細胞消化時殘留的胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。
二、胎牛血清有哪些重要的技術(shù)性指標?
1.內(nèi)毒素:標準為不高于10EU/mL。內(nèi)毒素是細菌破碎后細胞壁的成分,因此內(nèi)毒素含量的高低可表現(xiàn)出采血到生產(chǎn)系列過程中的無菌操作情況。
2.總蛋白含量:胎牛血清總蛋白含量般范圍是30-50mg/mL,數(shù)值偏高,說明采血的牛齡偏大,不是胎牛,數(shù)值偏低,表明血清可能摻水了。
3.血紅蛋白:標準為不高于30mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高。
4.pH:7.0~8.0。
5.微生物:包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原性病毒等。
6.免疫球蛋白(IgG):免疫球蛋白的數(shù)值能*體現(xiàn)出采血時的牛齡情況,新生牛的血清中容易產(chǎn)生IgM,IgG的含量也偏高,進口胎牛血清不含IgM,另外IgG的含量也較低。