液體培養(yǎng)基的配置原則

根據(jù)培養(yǎng)目的需要選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)
由于微生物營(yíng)養(yǎng)類型復(fù)雜，不同微生物有不同的營(yíng)養(yǎng)要求。因此，要根據(jù)不同微生物的營(yíng)養(yǎng)需求選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，配制針對(duì)性強(qiáng)的培養(yǎng)基。
自養(yǎng)微生物有較強(qiáng)的合成能力，能以簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物如co2和無(wú)機(jī)鹽合成復(fù)雜的細(xì)胞物質(zhì)。因此，培養(yǎng)自養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基應(yīng)由簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物組成。
異養(yǎng)微生物的合成能力較弱，不能以CO2作為碳源或主要碳源，故應(yīng)在培養(yǎng)基中至少添加一種有機(jī)物。
注意營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度與配比要合適
微生物只有在營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度及其比例合適時(shí)才能良好生長(zhǎng)。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度過(guò)低不能滿足現(xiàn)生長(zhǎng)需要，過(guò)高又抑制其生長(zhǎng)。例如，適量的蔗糖是異養(yǎng)微生物的良好碳源和能源，但高濃度蔗糖則抑制菌體生長(zhǎng)。金屬離子是微生物生長(zhǎng)所需要的礦質(zhì)養(yǎng)分，但濃度擴(kuò)大，尤其是重金屬離子，反而抑制其生長(zhǎng)，甚至產(chǎn)生殺菌作用。
控制培養(yǎng)基的條件
(1) 控制培養(yǎng)基的pH 配制培養(yǎng)基必須根據(jù)微生物的特點(diǎn)調(diào)節(jié)pH。各大類微生物要求的適宜生長(zhǎng)pH范圍不同。如霉菌與酵母菌一般為5.0-6.0, 細(xì)菌為6.5-7.5.放線菌為7.5-8.5.培養(yǎng)基的pH與其C/N有極大關(guān)系。C/N高的培養(yǎng)基，例如培養(yǎng)各種真菌的培養(yǎng)基，經(jīng)培養(yǎng)后其pH明顯下降;相反，C/N低的培養(yǎng)基，例如培養(yǎng)一般細(xì)菌的培養(yǎng)基， 經(jīng)培養(yǎng)后，其pH則明顯上升。這是由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗與代謝產(chǎn)物的積累，改變了培養(yǎng)基的pH，若不及時(shí)控制，將導(dǎo)致菌體生長(zhǎng)停止。
(2)調(diào)節(jié)氧化還原電位(Eh) 各種微生物對(duì)培養(yǎng)基的Eh要求不同。適宜好氧微生物生長(zhǎng)的Eh值一般為+0.3~+0.4V，厭氧微生物只能在+0.1V以下生長(zhǎng)，因此，培養(yǎng)好氧微生物必須保證氧的供應(yīng)，可在培養(yǎng)基中加入氧化劑提高Eh值。
(3)調(diào)節(jié)滲透壓 多數(shù)微生物能耐受較大范圍滲透壓的變化。培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度過(guò)大，會(huì)使?jié)B透壓過(guò)高，使細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離而抑制微生物生長(zhǎng)。低滲溶液則使細(xì)胞吸水膨脹易破裂，因此，配制培養(yǎng)基時(shí)要掌握營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度。常在培養(yǎng)基中加人適量的Nacl以提高滲透壓。
原料來(lái)源的選擇力求節(jié)約
配制培養(yǎng)基還應(yīng)遵循力求節(jié)約的原則，盡量選用價(jià)格便宜、來(lái)源方便的原料。特別是在工業(yè)發(fā)酵中，培養(yǎng)基用量大，更應(yīng)注意利用低成本的原料，降低產(chǎn)品成本。
滅菌處理
為了避免雜菌污染，獲得微生物純培養(yǎng)物，培養(yǎng)基必須及時(shí)嚴(yán)格滅菌。通常采用高壓蒸汽滅菌。一般培養(yǎng)基用0. IMPa (121℃)維持15 ~ 30min即可滅菌。長(zhǎng)時(shí)間的高溫滅菌會(huì)使某些不耐熱的物質(zhì)破壞，如使糖類物質(zhì)形成氨基糖、焦糖。因此，含糖培養(yǎng)基常用0.05MPa (110℃) 滅菌20 ~ 30min某些對(duì)糖類要求更高的培養(yǎng)基，可先將糖過(guò)濾除菌或間歇滅菌，再與其他已滅菌的成分混合。長(zhǎng)時(shí)間高溫滅菌也會(huì)使磷酸鹽、碳酸鹽與鈣、鎂鐵等陽(yáng)離子形成難溶性化合物而產(chǎn)生沉淀。為了防止這類沉淀發(fā)生，可將這些物質(zhì)分別滅菌，冷卻后再混合；也可在培養(yǎng)基中加入少量整合劑(0.01%乙二胺四乙酸，即EDTA)使金屬離子形成可溶性絡(luò)合物，防止沉淀的產(chǎn)生。高壓蒸汽滅菌一般使培養(yǎng)基 pH降低， 應(yīng)在配制培養(yǎng)基時(shí)加以調(diào)節(jié)。